Взятие крови из яремной вены у крс
Взятие крови из яремной вены у крс
Массовое взятие крови у поголовья крупного рогатого скота (КРС) – это трудоёмкая и травмирующая животное процедура. Проблемное состояние поголовья КРС в России, по основным видам заболеваемости, делает эту работу частой и неизбежной процедурой, направленной на оздоровление животных.
В связи с этим разработка новых, надёжных, нетравмирующих животных и наименее трудоёмких методов взятия крови у крупного рогатого скота, является актуальной задачей.
Использование вакуумных шприцев – контейнеров, как показала практика применения в нескольких областях РФ, может коренным образом изменить технологию взятия крови у поголовья КРС.
Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.
В комплексе это позволило хозяйствам, использующим современную технологию, избегать прямых экономических потерь, в первую очередь связанных с исключением снижения уровня надоев.
S – Monovette (производство фирмы Sarstedt , Германия) – это очень удобное и современное изделие, для взятия венозной крови. Оно представляет собой закрытую двухкомпонентную систему – вакуумный шприц-контейнер и специальную иглу. Выделение сыворотки или соединение крови с антикоагулянтом происходит в том же объёме шприца, в который берётся кровь, то есть после взятия крови сам шприц является транспортной пробиркой с антикоагулянтом или сывороткой.
Чтобы определить, в чем заключается основные преимущества использования S – Monivette , сравним два метода взятия крови – устоявшийся, применяемый в настоящее время в большинстве хозяйств, и с применение S – Monovette
- Кровь берут из v.jugularis (яремная вена);
- Место, где предполагается произвести прокол, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода;
- Для взятия крови животное фиксируют – привязывают голову животного;
- Большим пальцем нажимают на вену в нижней трети шеи. Задержка оттока крови вызывает набухание вены в виде толстого шнура;
- Кровопускательную иглу вводят под острым углом по направлению к голове, продвигая в полость сосуда приблизительно на 1 см.;
- Кровь в пробирку набирают по стенке.
Кроме того, необходимо готовить посуду, добавлять антикоагулянт для анализов на общую гематологию, выделять сыворотку и удалять сгусток для анализов , требующих получения сыворотки.
Недостатки устоявшегося метода взятия крови из яремной вены кровопускательной иглой:
- Разбрызгивание крови; (попадание крови на руки, кормушки и др. объекты окружающей среды).
- Высокий риск распространения инфекций, опасных не только для животных, но и для человека; (туберкулез, бруцеллез, лейкоз КРС).
- Необходимость фиксации животного.
- Стресс у животного, ведущий к потерям молока (более 5%).
- Осложнения после взятия крови; (гематомы, абсцессы).
- Взятая кровь – нестерильна (т.е. контаминирована).
Применение S – Monovette коренным образом меняет методику взятия крови.
Современные методы забора крови у сельскохозяйственных животных
В последние годы ветеринары проявляют всё больший интерес к современной методике забора крови у сельскохозяйственных животных с использованием систем вакуумного забора крови. Однако, не всем специалистам удалось из первых рук получить достоверную информацию об особенностях и преимуществах новой методики и ознакомиться с ней на практике.
До сегодняшнего дня широко распространённым способом забора крови у животных (в частности КРС) остаётся взятие её из ярёмной вены либо из хвостовой вены, но также, как и из ярёмной, с использованием кровопускательных (или инъекционных) игл и стеклянных пробирок (не вакуумных). Но данная методика имеет ряд серьёзных недостатков:
- Кровь набирается через кровопускательную иглу самотёком в открытую пробирку. Это очень часто приводит к разбрызгиванию крови, в связи с чем высок риск инфицирования животных и человека. Некоторые используют шприцы, но это не избавляет от необходимости переливать кровь в открытую пробирку. Если нужна не сыворотка, которая выделится в стеклянной пробирке (но не в пластиковой), а цельная кровь, то нужно вручную отмерять необходимый для исследований объём крови и затем вручную добавлять нужное количество реагентов (где тоже возможны ошибки в дозировке). К тому же, переливание крови из шприца в пробирку зачастую приводит к гемолизу, что искажает результаты исследований или делает их невозможными. Также ошибочным является взятие крови шприцом с последующим переливанием крови в вакуумную пробирку.
- Набранная самотёком в открытую пробирку, кровь теряет свою стерильность из-за воздействия на неё внешней среды, следовательно, результаты лабораторных исследований могут быть искажены. Стеклянные пробирки закрываются либо нестерильными резиновыми пробками, либо ватными тампонами, что часто приводит к открытию пробирки с разлитием крови.
- Стеклянные пробирки часто разбиваются – соответственно, нужно не только ликвидировать последствия этого в виде осколков и разлитой крови, но и повторно брать пробу крови у животного.
- При заборе крови из ярёмной вены необходима фиксация животного, то есть привлечение к процедуре дополнительного персонала, с соответствующими затратами труда, нервов, времени и финансов.
- Жёсткая фиксация, а также боль при взятии крови толстостенными кровопускательными иглами большого диаметра вызывает стресс у животных. В случае с КРС это приводит к неизбежному снижению надоев молока от 0,3 до 1 л в день в течение нескольких дней. На 1000 голов убытки от падения надоев могут составлять до 20-25 тыс. руб (кстати, одна только эта сумма значительно превышает стоимость вакуумных систем забора крови, необходимых для забора крови у 1000 голов).
- Грубая фиксация приводит к массовому перезаражению лейкозом ранее здоровых животных, через травмирование слизистой носовой полости.
Системы вакуумного забора венозной крови имеют преимущества, более чем достаточные для того, чтобы навсегда забыть о прежней методике взятия крови.
Состоит вакуумная система из трёх компонентов:
- Двусторонняя игла – резьбовая, либо автоматическая (разной длины и диаметра).
- Иглодержатель – резьбовой, либо автоматический.
- Вакуумная пробирка.
Пробирка стерильна, герметична, изготовлена из небьющегося биологически инертного пластика (полиэтилентерефталат), не влияющего на результаты исследований.
Пробирки содержат реагент, распылённый по стенкам:
- для получения сыворотки используется активатор свёртывания (кремниевое напыление, активирующее образование сгустка крови и выделение сыворотки);
- для получения цельной крови используется антикоагулянт К2 ЭДТА (Трилон Б).
В пробирку не надо вручную добавлять реагенты – после забора крови вакуумную пробирку (как с крышкой, так и без неё) можно центрифугировать и помещать в анализатор.
Пробирки могут быть с разным объёмом вакуума (следовательно, и объёмом забираемой крови) – от 2 до 10 мл. Самые востребованные объёмы – 9-10 мл (для КРС, свиней, лошадей). Для мелких животных можно использовать пробирки на 2, 3, 4 мл.
Преимущества вакуумных систем в сравнении с обычными иглами и пробирками:
- Двусторонние иглы с лазерной заточкой среза легко входят в вену, не вызывая сильных болезненных ощущений. Если кровопускательные или инъекционные иглы применяются диаметром 1,2 мм (18G), то двусторонние иглы вакуумных систем можно использовать диаметром 0,9 мм (20G) – так как эти иглы тонкостенные, то при меньшем внешнем диаметре иглы, её внутренний диаметр не уступает в пропускной способности иглам с толщиной 1,2 мм. Внешняя и внутренняя поверхности иглы обработаны силиконом, поэтому кровь свободно течёт в пробирку, не вызывая тромбирования иглы. Резиновый клапан на дистальном конце иглы предотвращает разбрызгивание крови в момент нахождения иглы в вене при отсутствии пробирки. Благодаря этому, можно набрать кровь в несколько пробирок, не вынимая иглы из вены – одна пробирка вынимается из иглодержателя, и вставляется другая пробирка для забора новой пробы крови (если необходимо взять кровь сразу на несколько видов исследований).
- Сохраняется герметичность системы во время взятия пробы, кровь остаётся стерильной и не разбрызгивается, что исключает возможность перекрёстного инфицирования.
- Вакуумная пробирка сделана из небьющегося материала. Не нужно собирать осколки стеклянных пробирок и убирать разлитую кровь (возможно инфицированную).
- Сокращается время свёртывания крови в пробирке. Благодаря активатору свёртывания (кремниевое напыление) сыворотка выделяется за 20-30 минут.
- Проба крови набирается в вакуумную пробирку, в ней же транспортируется в лабораторию, в ней же центрифугируется и в ней же исследуется в анализаторе. То есть, отпадает необходимость переливания крови из одной пробирки в другую.
Преимущества методики забора крови с использованием вакуумных систем:
- Кровь берётся из хвостовой вены КРС одним специалистом без фиксации животного. Это наиболее простой и эффективный способ, хотя можно брать кровь и из других вен.
- Отсутствие стресса у коровы исключает снижение надоев молока, что позволяет экономить значительные средства. Снижается или полностью отсутствует травмирование ветеринаров из-за ударов животных.
- На взятие крови у одной коровы, включая подготовку вакуумной системы, затрачивается около 30 секунд. Таким образом, ветеринарный врач может за один день самостоятельно, без помощников, взять пробы крови у стада КРС в 300-500 голов. Снижение времени пребывания ветработников в местах расположения животных позволяет последним спокойно принимать корм и отдыхать между дойками.
При взятии крови двусторонняя игла закрепляется в иглодержателе, вводится в вену, затем вакуумная пробирка вводится в иглодержатель таким образом, что дистальный конец иглы проходит сквозь мембрану крышки, и кровь, под воздействием вакуума, сама заполняет пробирку.
После наполнения кровью пробирка вынимается из иглодержателя, а иглодержатель с иглой извлекается из вены. Игла утилизируется. Пробирка аккуратно переворачивается 2-3 раза (для лучшего смешивания крови и реагента) и ставится в штатив, уже готовая к транспортировке в лабораторию, центрифугированию и исследованию в анализаторе.
ЗАО «Фирма «Домен» предлагает вакуумные системы Venosafe TERUMO (производство Бельгия) и Bodywin (производство Китай).
Между различными системами забора крови (в том числе, поставляемыми в Россию другими компаниями) принципиальных отличий нет. Однако, TERUMO (Бельгия) является единственным в мире производителем, который выпускает двусторонние иглы для вакуумных систем не только с резьбовым соединением с иглодержателем, но и с автоматическим (безрезьбовым). Эта отличительная особенность высоко оценена ветврачами, сталкивающимися с необходимостью забора крови сразу у нескольких десятков или сотен животных за один день силами одного или двух человек.
При использовании резьбовых игл необходимо учитывать дополнительные затраты времени и сил персонала для того, чтобы извлечь резьбовую иглу из иглодержателя, не нарушая технику безопасности, нужен специальный контейнер для утилизации игл, оснащённый разъёмом в крышке, куда вставляется игла и поворотом держателя выкручивается и падает в контейнер. Такие контейнеры достаточно дорогие и их мало кто применяет. Поэтому, специалисты вынуждены извлекать использованную резьбовую иглу из иглодержателя, надевая на неё защитный колпачок и вручную выкручивая и выкидывая в какую-нибудь тару. Если речь идёт о заборе крови у пары десятков голов, то особых проблем это не вызывает, если нарушение техники безопасности при таких манипуляциях для кого-то не является проблемой. Но при заборе крови у нескольких десятков или сотен голов (особенно немолодыми ветеринарами) возникает не только значительная потеря времени на вкручивание-выкручивание игл, но и перенапряжение рук (сухожилий). Кроме того, что самое неприятное и опасное, очень высока вероятность травмирования потенциально инфицированной использованной иглой при очередном надевании на неё колпачка для последующего выкручивания из иглодержателя. Поэтому, использование автоматических игл и иглодержателей на практике выгоднее и безопаснее, чем резьбовых, несмотря на то, что автоматические чуть дороже. Стоят автоматические иглы лишь на 50 копеек дороже резьбовых (производства TERUMO). Разница в цене автоматических и резьбовых иглодержателей на первый взгляд достаточно велика, но она становится совершенно несущественной при пересчёте стоимости держателя на одну процедуру забора крови – автоматические иглодержатели с механизмом сброса иглы можно использовать до 500 раз, подвергая соответствующей обработке после каждого использования. То есть, себестоимость иглодержателя в пересчёте на 1 забор крови = 3-5 копеек.
Использовать автоматические (безрезьбовые) иглы и иглодержатели очень легко. Игла просто защёлкивается в держатель, а после использования, нажатием 2-х кнопок, сбрасывается в любой контейнер для утилизации игл (даже неспециализированный). Тут же в иглодержатель можно защёлкивать новую иглу, и так же быстро сбросить после очередного использования. Иглодержатель, при правильном использовании, не контактирует с кровью, поэтому на практике он не может быть звеном передачи инфекции. Но, для соблюдения санитарных норм, каждый иглодержатель после использования должен быть подвергнут соответствующей обработке для дезинфекции.
Кроме наличия автоматических игл и иглодержателей, преимуществом ЗАО «Фирма «Домен», как поставщика вакуумных систем, является то, что в нашем ассортименте всегда имеются в наличии не только двусторонние иглы длиной полтора дюйма (1 1/2″ = 38-40 мм), но и длиной 1 дюйм (1″ = 25 мм). При заборе крови из ярёмной вены КРС и свиней используются иглы длиной 40 мм, а при заборе крови из хвостовой вены КРС можно применять иглы и на 40 мм, но гораздо удобнее на 25 мм.
Автоматические иглы и иглодержатели Терумо (Бельгия) можно использовать вместе с пробирками других производителей – они все сделаны по единым стандартам – поэтому, при необходимости экономии средств, можно к ним закупать пробирки Бодивин (Китай).
ЗАО «Фирма «Домен», г. Санкт-Петербург, с 2000 года осуществляет прямые поставки в Россию данной продукции. Товар, постоянно имеющийся в наличии на наших складах в Санкт-Петербурге, мы готовы поставить в кратчайшие сроки, как по прямым договорам, так и через систему госзакупок (аукционы, котировки). Методика забора крови описана в «Сборнике методических указаний по применению вакуумных систем забора крови в ветеринарной практике», выпущенном нашей компанией (высылаем в электронном виде по Вашему запросу). Обращайтесь по телефону: +7(812)327-75-85.
Рекомендации по правилам взятия проб крови от крупного рогатого скота
Рекомендации
по правилам взятия проб крови от крупного рогатого скота
Условия взятия крови и ее сохранность до начала лабораторных исследований имеют важное значение при получении достоверных результатов. Во многом эти результаты зависят от техники взятия крови и используемых при этой инструментов.
При венепункции прокол окружающих вену тканей и стенки вен делают в один прием.
На результаты лабораторных исследований могут влиять факторы, связанные с индивидуальными особенностями и физиологическим состоянием организма животного, такие как: возраст; эмоциональное состояние и психический стресс; климатические и метеорологические условия и др.
Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животных.
Рекомендуется произвести дегельминтизацию животных за 2 недели до взятия крови.
В целях отсутствия получения ложно-положительных результатов исследований рекомендуют брать кровь не позднее, чем за три недели до отела и не ранее чем через 3 недели после отела.
На точность и правильность результатов также оказывает влияние техника взятия крови, используемые при этом инструменты (иглы, шприцы и др.), пробирки, в которые берется, а в последующем хранится и транспортируется кровь, а также условия хранения и подготовки пробы к анализу.
Традиционные и широко используемые в настоящее время способы взятия крови с помощью иглы и/или шприца оказываются основными источниками лабораторных ошибок, приводящих к низкому качеству результатов анализов. Кроме того, эти методы не могут быть стандартизованы и не обеспечивают безопасность персонала, берущего кровь.
При взятии проб венозной крови методом самотека с использованием иглы и обычных пробирок высока вероятность попадания крови животного на руки ветеринарного специалиста. В этом случае руки ветеринарного работника могут стать источником передачи и распространения возбудителей гемоконтактных инфекций другому животному путем контаминации кровью инъекционной ранки. Ветеринарный работник сам может заразиться от источника инфекции.
Использование медицинского шприца с иглой для взятия крови следует также избегать из-за его недостаточной безопасности для ветеринарного персонала и невозможности исключения гемолиза крови при переносе пробы под давлением в пробирку.
Взятие крови с использованием вакуум-содержащих систем:
Для взятия проб венозной крови наиболее предпочтительно использовать вакуум-содержащие системы. Этот способ имеет ряд преимуществ, основным из которых является то, что кровь попадает непосредственно в закрытую пробирку, предотвращающую любой контакт ветперсонала с кровью животного.
Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.
Вакуум-содержащая система представляет собой закрытую двухкомпонентную систему – вакуумный шприц-контейнер и специальную иглу. Выделение сыворотки или соединение крови с антикоагулянтом происходит в том же объёме шприца, в который берётся кровь, то есть после взятия крови сам шприц является транспортной пробиркой с антикоагулянтом или сывороткой.
Под действием вакуума кровь втягивается через иглу вакуумной системы напрямую из вены в пробирку и сразу же смешивается с химическим реактивом. Тщательно дозированный объем вакуума обеспечивает точное соотношение кровь/реагент в пробирке.
На основе возможностей вакуум-содержащихх систем был разработан новый метод взятия крови у крупного рогатого скота из хвостовой вены:
- Кровь берут из v .с occygea (хвостовая вена).
- Для взятия крови животное не фиксируют.
- Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх.
- Место взятия крови, область 2-5 хвостовых позвонков, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода.
- Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части.
- Иглу вводят под углом 90° до упора на глубину 5-10 мм.
Преимущества взятия крови безопасными системами из хвостовой вены:
1. Сокращение времени взятия крови ветврачом; (до 200 животных за 2 часа)
2. Отсутствие фиксации животного;
3. Исключение контакта ветврача с кровью на всех этапах взятия и транспортировки крови;
4. Предупреждение распространения инфекций через кровь и загрязнения (контаминации) объектов окружающей среды; (особенно актуально при лейкозе КРС)
5. Минимизация осложнений и стресса у животных;
6. Отсутствие сокращения надоев в результате стресса и осложнений
7. Возможность получения стерильной крови.
Взятие крови с использованием кровобрательных игл и пробирок:
Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать противоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют дезинфицирующим раствором.
У крупного рогатого окота кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.
Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота.
При взятии крови из яремной вены иглу вкалывают на границе перехода верхней трети шеи в среднюю. Чтобы вызвать достаточное наполнение вены и уменьшать ее подвижность, вену сдавливает в середине шеи резиновым жгутом или пальцем. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом – в 20–30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.
Кровь должна стекать по стенке пробирки по избежании разрушения эритроцитов и при необходимости немедленно смешиваться с достаточным количеством антикоагулянта.
Перед извлечением иглы из вены резиновый жгут снимают, пережимают вену пальцем выше места вкола, иглу извлекают, а место вкола некоторое время сдавливают тампоном для предотвращения образования гематомы. В заключении область венепункции дезинфицируют дезинфицирующим раствором.
Недостатки устоявшегося метода взятия крови из яремной вены кровопускательной иглой:
- Разбрызгивание крови; (попадание крови на руки, кормушки и др. объекты окружающей среды).
- Высокий риск распространения инфекций, опасных не только для животных, но и для человека; (туберкулез, бруцеллез, лейкоз КРС).
- Необходимость фиксации животного.
- Стресс у животного, ведущий к потерям молока (более 5%).
- Осложнения после взятия крови; (гематомы, абсцессы).
- Взятая кровь – нестерильна (т.е. контаминирована).
Хранение проб крови и сыворотки крови:
Цельную кровь, плазму и сыворотку для непродолжительного хранения помещают в холодильник (+2…+4°С), длительное хранение сыворотки требует температуры – 20°С.
Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают 30-60 мин при 20-30°С или 37-38°С, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем пробирки выдерживают при 4-10°С 20-24 ч.
Отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки, закрывают пробками и направляют в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.
Нарушение условий хранения проб может стать причиной погрешностей анализа. В результате длительного стояния сыворотки, над эритроцитами могут наступить сдвиги в концентрации ряда компонентов: повышается концентрация калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы, понижается содержание глюкозы вследствие гликолитических процессов.
При температуре около 20°С в цельной крови возрастает содержание аммиака, многие ферменты даже при температуре холодильника быстро теряют свою активность (креатинкиназа, кислая фосфатаза), в лактатдегидрогеназа, напротив, быстрее теряет активность при низких температурах.
Возникший при взятии или хранении гемолиз эритроцитов приводит к повышению концентрации калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы.
Неумелое встряхивание проб при перемешивании их содержимого или при транспортировке также может вызвать гемолиз эритроцитов.
Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.
Сыворотка крови должна быть доставлена в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.
При пересылке сыворотки на большое расстояние, особенно летом, её необходимо консервировать 5%-ным раствором карболовой кислоты на физиологическом растворе из расчета на каждые 9 мл сыворотки 1 мл раствора карболовой кислоты или 1-2 капли раствора на 1 мл сыворотки.
Раствор карболовой кислоты необходимо подливать по каплям при постоянном встряхивании пробирки с сывороткой.
Сыворотку или кровь можно консервировать также борной кислотой (в порошке) из расчета 0,05-0,07 г (на кончике скальпеля) на одну пробирку с кровью (сывороткой).
На каждой пробе сыворотки или крови указывают ее номер или кличку животного или фамилию владельца животного.
Пробирки с кровью и сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.
Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзли.
Пробы направляют с сопроводительной в двух экземплярах
Взятие крови для гематологических исследований
Кровь для гематологических исследований берут из ярёмной или каудальной (хвостовой) вены в специальные системы забора крови с антикоагулянтом или в пробирки с антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА-динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл 10 %-ного раствора на 1 мл крови, гепарин (5ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл).
Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 0 С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.
ГЛАВНАЯ
Правила взятия крови у КРС
Рекомендации
по правилам взятия проб крови от крупного рогатого скота
Условия взятия крови и ее сохранность до начала лабораторных исследований имеют важное значение при получении достоверных результатов. Во многом эти результаты зависят от техники взятия крови и используемых при этой инструментов.
При венепункции прокол окружающих вену тканей и стенки вен делают в один прием.
На результаты лабораторных исследований могут влиять факторы, связанные с индивидуальными особенностями и физиологическим состоянием организма животного, такие как: возраст; эмоциональное состояние и психический стресс; климатические и метеорологические условия и др.
Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животных.
Рекомендуется произвести дегельминтизацию животных за 2 недели до взятия крови.
В целях отсутствия получения ложно-положительных результатов исследований рекомендуют брать кровь не позднее, чем за три недели до отела и не ранее чем через 3 недели после отела.
На точность и правильность результатов также оказывает влияние техника взятия крови, используемые при этом инструменты (иглы, шприцы и др.), пробирки, в которые берется, а в последующем хранится и транспортируется кровь, а также условия хранения и подготовки пробы к анализу.
Традиционные и широко используемые в настоящее время способы взятия крови с помощью иглы и/или шприца оказываются основными источниками лабораторных ошибок, приводящих к низкому качеству результатов анализов. Кроме того, эти методы не могут быть стандартизованы и не обеспечивают безопасность персонала, берущего кровь.
При взятии проб венозной крови методом самотека с использованием иглы и обычных пробирок высока вероятность попадания крови животного на руки ветеринарного специалиста. В этом случае руки ветеринарного работника могут стать источником передачи и распространения возбудителей гемоконтактных инфекций другому животному путем контаминации кровью инъекционной ранки. Ветеринарный работник сам может заразиться от источника инфекции.
Использование медицинского шприца с иглой для взятия крови следует также избегать из-за его недостаточной безопасности для ветеринарного персонала и невозможности исключения гемолиза крови при переносе пробы под давлением в пробирку.
Взятие крови с использованием вакуум-содержащих систем:
Для взятия проб венозной крови наиболее предпочтительно использовать вакуум-содержащие системы. Этот способ имеет ряд преимуществ, основным из которых является то, что кровь попадает непосредственно в закрытую пробирку, предотвращающую любой контакт ветперсонала с кровью животного.
Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.
Вакуум-содержащая система представляет собой закрытую двухкомпонентную систему – вакуумный шприц-контейнер и специальную иглу. Выделение сыворотки или соединение крови с антикоагулянтом происходит в том же объёме шприца, в который берётся кровь, то есть после взятия крови сам шприц является транспортной пробиркой с антикоагулянтом или сывороткой.
Под действием вакуума кровь втягивается через иглу вакуумной системы напрямую из вены в пробирку и сразу же смешивается с химическим реактивом. Тщательно дозированный объем вакуума обеспечивает точное соотношение кровь/реагент в пробирке.
На основе возможностей вакуум-содержащихх систем был разработан новый метод взятия крови у крупного рогатого скота из хвостовой вены:
1. Кровь берут из v .с occygea (хвостовая вена).
2. Для взятия крови животное не фиксируют.
3. Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх.
4. Место взятия крови, область 2-5 хвостовых позвонков, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода.
5. Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части.
6. Иглу вводят под углом 90° до упора на глубину 5-10 мм.
Преимущества взятия крови безопасными системами из хвостовой вены:
1. Сокращение времени взятия крови ветврачом; (до 200 животных за 2 часа)
2. Отсутствие фиксации животного;
3. Исключение контакта ветврача с кровью на всех этапах взятия и транспортировки крови;
4. Предупреждение распространения инфекций через кровь и загрязнения (контаминации) объектов окружающей среды; (особенно актуально при лейкозе КРС)
5. Минимизация осложнений и стресса у животных;
6. Отсутствие сокращения надоев в результате стресса и осложнений
7. Возможность получения стерильной крови.
Взятие крови с использованием кровобрательных игл и пробирок:
Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать противоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют дезинфицирующим раствором.
У крупного рогатого окота кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.
Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота.
При взятии крови из яремной вены иглу вкалывают на границе перехода верхней трети шеи в среднюю. Чтобы вызвать достаточное наполнение вены и уменьшать ее подвижность, вену сдавливает в середине шеи резиновым жгутом или пальцем. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом – в 20–30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.
Кровь должна стекать по стенке пробирки по избежании разрушения эритроцитов и при необходимости немедленно смешиваться с достаточным количеством антикоагулянта.
Перед извлечением иглы из вены резиновый жгут снимают, пережимают вену пальцем выше места вкола, иглу извлекают, а место вкола некоторое время сдавливают тампоном для предотвращения образования гематомы. В заключении область венепункции дезинфицируют дезинфицирующим раствором.
Недостатки устоявшегося метода взятия крови из яремной вены кровопускательной иглой:
1. Разбрызгивание крови; (попадание крови на руки, кормушки и др. объекты окружающей среды).
2. Высокий риск распространения инфекций, опасных не только для животных, но и для человека; (туберкулез, бруцеллез, лейкоз КРС).
3. Необходимость фиксации животного.
4. Стресс у животного, ведущий к потерям молока (более 5%).
5. Осложнения после взятия крови; (гематомы, абсцессы).
6. Взятая кровь – нестерильна (т.е. контаминирована).
Хранение проб крови и сыворотки крови:
Цельную кровь, плазму и сыворотку для непродолжительного хранения помещают в холодильник (+2…+4°С), длительное хранение сыворотки требует температуры – 20°С.
Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают 30-60 мин при 20-30°С или 37-38°С, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем пробирки выдерживают при 4-10°С 20-24 ч.
Отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки, закрывают пробками и направляют в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.
Нарушение условий хранения проб может стать причиной погрешностей анализа. В результате длительного стояния сыворотки, над эритроцитами могут наступить сдвиги в концентрации ряда компонентов: повышается концентрация калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы, понижается содержание глюкозы вследствие гликолитических процессов.
При температуре около 20°С в цельной крови возрастает содержание аммиака, многие ферменты даже при температуре холодильника быстро теряют свою активность (креатинкиназа, кислая фосфатаза), в лактатдегидрогеназа, напротив, быстрее теряет активность при низких температурах.
Возникший при взятии или хранении гемолиз эритроцитов приводит к повышению концентрации калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы.
Неумелое встряхивание проб при перемешивании их содержимого или при транспортировке также может вызвать гемолиз эритроцитов.
Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.
Сыворотку или кровь можно консервировать также борной кислотой (в порошке) из расчета 0,05-0,07 г (на кончике скальпеля) на одну пробирку с кровью (сывороткой).
Пробирки с кровью и сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.
Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзли.
Пробы направляют с сопроводительной в двух экземплярах (см. приложение 1).
Взятие крови для гематологических исследований
Кровь для гематологических исследований берут из ярёмной или каудальной (хвостовой) вены в специальные системы забора крови с антикоагулянтом или в пробирки с антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА-динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл 10 %-ного раствора на 1 мл крови, гепарин (5ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл).
Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 0 С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.
СЛУЖБА ВЕТЕРИНАРИИ ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ
ОБЛАСТНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
_____________ СТАНЦИЯ ПО БОРЬБЕ С БОЛЕЗНЯМИ ЖИВОТНЫХ
Индекс, Иркутская область, _______ район Телефон: (8-395- ) _______
Город (поселок, село) _____, улица _____, дом ___ Е- mail —-. vet @ govirk . ru
должность, Ф.И.О. наименование подразделения
В ___________________________________ ветеринарную диагностическую лабораторию
Направляется____________ проб крови (сыворотки крови) от ________________________
(наименование хозяйства, населенного пункта, района)
Для ___________________ исследования на _______________________________________
(вид исследования) (наименование заболевания) _____________________________________________________________________________Благополучное по _____________________________________________________________
(благополучное, неблагополучное, наименование заболевания)
Исследование проводится первично, повторно (подчеркнуть)
Дата и результат предыдущего исследования __________.___________________ 20 ____г.
Дата взятия крови _____________________________________________________________
Опись прилагается в двух экземплярах.
Ведомость (опись) животных, от которых взята кровь для исследования
Взятие крови у КРС из подхвостовой вены и яремной
Взятие крови у крупного рогатого скота считается довольно трудной и травмирующей процедурой. В связи, с разными видами заболеваний данную процедуру делают довольно часто. На сегодняшний день осуществляют взятие крови у коров из хвостовой вены, яремной и молочной. Для упрощения работы были разработаны вакуумные шприцы, благодаря которым процедура взятия крови из хвостовой вены становится совершенно безопасной.
Подготовка к забору крови у КРС
Как правило, у коров забор крови делают из яремной вены, находящейся в верхней трети шеи. Объем полученного материала для исследования не должен быть меньше 5 мл с антикоагулянтом 0,5 М ЭДТА.
Используемые иглы перед началом процедуры стоит предварительно простерилизовать, используя для этих целей кипячение. Важно учитывать, что забор у каждой коровы нужно осуществлять новой иглой.
Место взятия обязательно дезинфицируют. Для дезинфекции используют спирт или 5% раствор йода. Во время взятия пробы животное должно быть надежно зафиксировано – привязывают голову.
После того как материал для исследования был взят, стоит плотно закрыть пробирку и перевернуть ее несколько раз, чтобы произошло смешивание с антикоагулянтом. При этом не допускается встряхивание. Каждую пробирку нумеруют согласно описи.
Самым эффективным способом является взятие крови из подхвостовой вены. В данном случае корову необязательно фиксировать. Пробирки рекомендуется в дальнейшем хранить при температурном режиме от +4°С до +8°С. Для этих целей отлично подойдет холодильник. Не стоит использовать морозильную камеру. В случае если во взятом образце появились сгустки, к дальнейшему исследованию он непригоден.
Методы взятия крови у коров
На сегодняшний день существует несколько методов взятия крови у крупного рогатого скота. Ее берут из таких вен:
Перед тем как осуществить процедуру, рекомендуется предварительно зафиксировать животное, что исключит травмирование. В таком состоянии корова также не сможет опрокинуть пробирку. Перед процедурой потребуется продезинфицировать место забора крови с использованием раствора фенола, спирта или йода.
Взятие образца из яремной вены является одним из самых популярных способов. Как правило, процедуру проводят рано утром либо до того, как корова получит корм. Для проведения процедуры голову животного привязывают и фиксируют в неподвижном состоянии. Иглу необходимо вводить под острым углом, при этом кончик обязательно направлен к голове.
Из молочной вены допускается делать забор крови для исследования только у взрослой особи. Молочные вены расположены на боковой части вымени и тянутся вниз по брюшной части. Через них происходит снабжение молочных желез кровью и питательными веществами. Стоит отметить, что чем лучше развиты молочные вены, тем больше молока можно получить от коровы.
Безопаснее всего брать образцы для исследований из хвостовой вены. Место укола, так же как и в остальных случаях, необходимо продезинфицировать. Если выбрать место для укола на уровне от 2 до 5 позвонка, то процедура пройдет более гладко.
Взятие крови у коров из хвостовой вены
Как показывает практика, забор крови из хвостовой вены для проведения исследований является самым безопасным вариантом. Для этих целей можно использовать обычную иглу либо воспользоваться специальной вакуумной системой. Такие системы уже включают специальные пробирки, в которых содержится антикоагулянт и требуемое давление, что позволяет крови из хвостовой вены вытекать в емкость плавно.
Перед тем как сделать забор образца из хвостовой вены, необходимо с помощью спирта либо йодного раствора продезинфицировать место укола. После этого хвост у коровы приподнимают и удерживают его за среднюю треть. В данном случае иглу необходимо вводить плавно в хвостовую вену, угол наклона должен составлять 90 градусов. Иглу, как правило, вводят до упора.
Такой способ забора имеет большое количество преимуществ:
- взятый образец полностью стерилен;
- в пробирке практически не образуются сгустки, в результате чего все образцы пригодны для исследования;
- для проведения данной процедуры не требуется много времени. Опытный ветеринар на протяжении 60 минут может звать образцы у 200 животных;
- при использовании такого метода не возникает побочных эффектов, при этом шанс травмирования крупного рогатого скота сводится к минимуму;
- контакт с кровью минимальный;
- животное не испытывает стресс, привычный уровень удоя сохраняется.
Такой метод наиболее часто используют на крупных фермерских хозяйствах, где необходимо взять большое количество проб за короткий промежуток времени.
Взятие крови у КРС из яремной вены
В случае если необходимо осуществить забор крови из яремной вены, рекомендуется вставлять иглу на границе, где происходит переход верхней трети шеи в среднюю. Первым делом необходимо вызвать достаточный уровень наполнения вены и минимизировать ее подвижность. Для этих целей рекомендуется сдавить вену при помощи резинового жгута либо пальцев.
Во время прокола потребуется держать в руке шприц с иглой таким образом, чтобы направление иглы совпадало с линией хода прокалываемой вены. Необходимо следить за тем, чтобы срез иглы был направлен вверх, в сторону головы. Иглу стоит вставлять под углом от 20 до 30 градусов. Если игла попала в вену, то из нее начнет вытекать кровь.
Перед тем как извлечь иглу из яремной вены коровы, стоит предварительно снять резиновый жгут, а вену пережать пальцами. Пережимать необходимо чуть выше того места, где находится игла. Иглу постепенно извлекают, а место укола рекомендуется некоторое время сдавливать ватным тампоном, что позволит предотвратить образование гематом на теле животного. В завершении процедуры место венепункции дезинфицируют спиртом либо настойкой йода и обрабатывают раствором «Коллодия».
Взятие крови из молочной вены
В данном случае необходимо учитывать, что забор крови из молочной железы можно делать только у взрослых особей. Необходимую вену можно обнаружить сбоку на вымени.
Перед тем как осуществить забор пробы, рекомендуется предварительно зафиксировать животное. Как правило, для проведения процедуры потребуется присутствие нескольких человек. Первым делом необходимо сбрить либо состричь волосяной покров с того места, где планируется делать прокол иглой. После этого подготовленный участок дезинфицируют с использованием спирта либо йодного раствора.
В хорошей видимости должен находиться своеобразный бугорок небольшого размера, куда и рекомендуется вводить иглу. Так как можно довольно легко нанести вред корове, то иглу вводят максимально осторожно. Ее необходимо ввести под углом, параллельно ходу вены, пока игла точно не попадет в нее и не появиться венозная кровь темного цвета.
Такой способ имеет некоторые преимущества:
- приемлемая стоимость материалов, необходимых для проведения исследований;
- для сбора образцов не требуется много времени;
- разбрызгивание крови минимальное.
Несмотря на это, имеются и существенные недостатки:
- риск нанести корове травму довольно высокий;
- придется контактировать с кровью животного;
- во время забора крови животное испытывает сильный стресс, так как иглу вводят в самое нежное место на теле;
- проводить данную процедуру довольно сложно.
Благодаря новым технологиям данный метод устарел, им практически не пользуются при проведении исследований.
Особенности вакуумного забора крови
Использование вакуумных систем имеет существенное преимущество, так как кровь после забора попадает сразу же в специальную пробирку, в результате чего не происходит контакта ветеринарного персонала с взятым образцом.
Такие системы состоят из вакуумного шприца, который служит контейнером, и специальной иглы. Соединение с антикоагулянтом осуществляется внутри вакуумного контейнера.
Если рассматривать преимущества вакуумного забора крови, то можно выделить следующее:
- на протяжении 2-х часов есть возможность сделать забор образцов для исследования у 200 животных;
- не требуется перед началом процедуры фиксировать животное в неподвижном состоянии;
- на всех этапах забора не происходит непосредственного контакта ветеринарного врача с кровью;
- так как кровь не контактирует с предметами из окружающей среды, то риск распространения инфекции сводится к нулю;
- животное практически не испытывает стресс во время проведения процедуры.
В результате того, что крупный рогатый скот не испытывает стрессов, у коров надой не уменьшается.
Заключение
Взятие крови у коров из хвостовой вены является самым популярным и безболезненным для животного методом. Как показывает практика, данный способ забора не требует много времени, в результате чего за короткий промежуток можно взять большое количество проб у крупного рогатого скота.
Источники:
http://www.rts-engineering.ru/Med/Sarstedt/lbSARvet.html
http://agropost.ru/veterinariya/veterinarnoe-oborudovanie/sovremennie-metodi-zabora-krovi.html
http://sukhinichi-vet.ru/ispyitatelnaya-laboratoriya/rekomendaczii-po-pravilam-vzyatiya-prob-krovi-ot-krupnogo-rogatogo-skota.html
http://1uilim.e-stile.ru/news/pravila-vzyatiya-krovi-u-krs/
http://fermilon.ru/hozyajstvo/zhivotnovodstvo/vzyatie-krovi-u-krs-iz-podhvostovoy-veny-i-yaremnoy.html